人鼻咽癌病毒（NPCV）酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書 本試劑盒僅供研究使用。 96T 使用目的： 本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中鼻咽癌病毒（NPCV）表達。 實驗原理 本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人鼻咽癌病毒（NPCV）表達。用純化的人鼻咽癌病毒（NPCV）抗體包被微孔板，制成固相抗體，可與樣品中鼻咽癌病毒（NPCV）相結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP標記的鼻咽癌病毒（NPCV）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），與CUTOFF值相比較，從而判定標本中人鼻咽癌病毒（NPCV）的存在與否。 人鼻咽癌病毒（NPCV）酶聯(lián)免疫分析試劑盒組成 
標本要求 1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融 2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。 人鼻咽癌病毒（NPCV）酶聯(lián)免疫分析操作步驟 1.編號：將樣品對應微孔按序編號，每板應設陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同） 2.加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻， 3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用 5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。 6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。 7.溫育：操作同3。 8.洗滌：操作同5。 9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘。 10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)）。 11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。 人鼻咽癌病毒（NPCV）酶聯(lián)免疫分析操作程序總結(jié)：  計算和結(jié)果判定： 試驗有效性：陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10 臨界值（CUT OFF）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15 陰性判定：樣品OD值< 臨界值（CUT OFF）者為鼻咽癌病毒（NPCV）陰性 陽性判定：樣品OD值≥ 臨界值（CUT OFF）者為鼻咽癌病毒（NPCV）陽性 。 人鼻咽癌病毒（NPCV）酶聯(lián)免疫分析注意事項 1．操作嚴格按照說明書進行，本試劑不同批號組分不得混用。 2．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。 3．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。 4.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 5．底物請避光保存。 6．試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準，使用雙波長檢測時，參考波長為630nm 7．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。終止液為2M的硫酸，使用時必須注意安全。 保存條件及有效期 1．試劑盒保存：2-8℃。 2．有效期：6個月 | 
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