一、細胞生長緩慢
營養物質不足
培養基中的營養成分是細胞生長的關鍵。如果培養基的配方不適合細胞類型，或者培養時間過長導致營養成分耗盡，細胞生長就會受到抑制。例如，對于快速增殖的腫瘤細胞系，基礎培養基可能需要添加額外的生長因子和氨基酸才能滿足其生長需求。
培養環境不佳
溫度對細胞生長影響顯著。大多數哺乳動物細胞的適宜生長溫度是 37℃左右。如果培養箱溫度不準確，過高或過低都會影響細胞的新陳代謝，導致生長緩慢。例如，溫度低于 37℃時，酶的活性降低，細胞的生化反應速度變慢。
氣體環境也很重要。細胞培養一般需要 5% 的二氧化碳來維持培養基的 pH 值在 7.2 - 7.4 之間。如果二氧化碳濃度不準確，pH 值發生改變，會影響細胞的生長。另外，培養箱中的氧氣濃度對于某些對氧敏感的細胞也很關鍵，過高或過低的氧氣含量可能會使細胞產生氧化應激，從而減緩生長。
細胞污染
微生物污染是導致細胞生長緩慢的常見原因之一。細菌、真菌和支原體污染都可能影響細胞生長。細菌和真菌污染通常比較容易發現，因為它們會使培養基變渾濁，產生異味。而支原體污染比較隱匿，它會爭奪細胞的營養物質，改變細胞的代謝環境，還可能干擾細胞的基因表達，從而抑制細胞生長。
細胞接種密度過低
細胞之間存在著相互作用，合適的接種密度可以提供細胞間的信號傳導，促進細胞生長。如果接種密度過低，細胞可能會進入一種靜止或緩慢生長的狀態，因為細胞分泌的一些生長促進因子在低密度情況下難以達到有效濃度。例如，神經干細胞在低密度接種時，由于缺乏足夠的細胞間相互作用，可能無法正常分化和增殖。
二、細胞不貼壁
培養器皿處理不當
用于細胞培養的器皿表面通常需要經過特殊處理，如用多聚賴氨酸、膠原蛋白等進行包被，以促進細胞貼壁。如果器皿沒有經過適當的包被處理，或者包被的物質質量不佳、濃度不合適，細胞就難以貼壁。例如，在培養上皮細胞時，合適濃度的膠原蛋白包被可以模擬體內細胞外基質的環境，有利于細胞貼壁生長；如果膠原蛋白濃度過低，細胞貼壁能力就會減弱。
培養基成分不合適
某些細胞的貼壁需要特定的培養基成分。例如，一些細胞需要血清中的貼壁因子來幫助它們附著在培養器皿表面。如果使用了無血清培養基，而沒有添加足夠的貼壁因子替代品，細胞可能不會貼壁。另外，培養基的滲透壓也會影響細胞貼壁，過高或過低的滲透壓可能導致細胞形態改變，從而影響貼壁。
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