操作ELISA試劑盒能夠從那些方面來(lái)挑選？
更新時(shí)間：2021-09-29 點(diǎn)擊次數(shù)：1263次
進(jìn)行ELISA試劑盒時(shí)不只要辦法正確，能夠從那些方面來(lái)挑選elisa試劑盒？購(gòu)買(mǎi)時(shí)也要留意。那能夠從那些方面來(lái)挑選elisa試劑盒呢？接下來(lái)跟我們來(lái)具體討論了解一下。
1、檢測(cè)方式
現(xiàn)在檢測(cè)ELISA試劑盒有許多途徑，咱們能夠根據(jù)自己的偏好進(jìn)行挑選。一般ELISA檢測(cè)的是酶促反應(yīng)的可溶性產(chǎn)品，抗體上結(jié)合有相應(yīng)的酶，而反應(yīng)體系中增加有相應(yīng)的底物。這種酶促反應(yīng)具有特征性的顏色，能夠經(jīng)過(guò)分光光度計(jì)進(jìn)行檢測(cè)，堿性磷酸酶ap也是一種常用酶。酶能夠結(jié)合在一抗上，也能夠結(jié)合在二抗上，還能夠運(yùn)用鏈霉親和素符號(hào)的酶與親和素符號(hào)的一抗結(jié)合。此外ELISA作用檢測(cè)還包括放射性檢測(cè)、熒光檢測(cè)、化學(xué)發(fā)光或顯色法檢測(cè)等。
2、實(shí)驗(yàn)類(lèi)型
盡管有多種類(lèi)型，不過(guò)它們都有一個(gè)共同特征，就是進(jìn)行抗原捕獲。一般捕獲方式包括將抗原吸附到微孔板或者用微孔板上的抗體進(jìn)行捕獲。in-cell Elisa和酶聯(lián)免疫斑斕elispot是兩種特別的類(lèi)型，in-cell Elisa需要將微孔板中培育的細(xì)胞進(jìn)行固定和通透化，然后再用抗體原位檢測(cè)。elispot有點(diǎn)像蛋白印跡western blot，先在帶膜的微孔板中培育細(xì)胞，然后在膜上檢測(cè)細(xì)胞分泌的抗原構(gòu)成斑斕。此外，咱們還需要根據(jù)本身需要挑選96孔板或是48孔板進(jìn)行Elisa實(shí)驗(yàn)。
3、抗體類(lèi)型
單克隆抗體和多克隆抗體都能夠用于Elisa檢測(cè)，實(shí)際上有時(shí)候二者結(jié)合作用更好。例如，關(guān)于雙抗夾心法而言，用多抗進(jìn)行捕獲而單抗進(jìn)行檢測(cè)有時(shí)更有幫助。多抗能夠確保捕獲所有抗原，隨后單抗再特異性檢測(cè)擁有特定抗原表位的抗原。
4、交叉反應(yīng)
假設(shè)抗體間發(fā)生沖突或交叉反應(yīng)就會(huì)影響整個(gè)實(shí)驗(yàn)的特異性。其中抗體來(lái)歷所帶來(lái)的兼容性就是交叉反應(yīng)的一個(gè)要素。盡管現(xiàn)在購(gòu)買(mǎi)源自zhi定動(dòng)物的抗體越來(lái)越容易，咱們?nèi)杂斜匾姓J(rèn)一下是否會(huì)發(fā)生交叉反應(yīng)的問(wèn)題。在用雙抗夾心法進(jìn)行Elisa檢測(cè)時(shí)，檢測(cè)用的二抗必須特異性針對(duì)檢測(cè)一抗，而不能與捕獲抗體起反應(yīng)。假設(shè)檢測(cè)用二抗與捕獲抗體結(jié)合，實(shí)驗(yàn)特異性就會(huì)大打折扣。一般咱們選用源自不同宿主的捕獲抗體和檢測(cè)一抗，來(lái)避免上述問(wèn)題。(內(nèi)容僅供參考，有問(wèn)題或遇到問(wèn)題請(qǐng)?jiān)诰€或lai電zi詢，我們會(huì)竭誠(chéng)為您服務(wù))
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