Q1.標(biāo)曲不顯色或顯色很弱，樣本顯色：
溶解標(biāo)準(zhǔn)品以及倍比稀釋時(shí)，未渦旋轟動(dòng)或不可充沛。
標(biāo)準(zhǔn)品溶解、倍比稀釋時(shí)均需求渦旋轟動(dòng)以保證充沛混勻。單純依托移液器重復(fù)吹打，效率較低、效果也不必定jia。
Q2.樣本經(jīng)不同梯度稀釋?zhuān)?strong>ELISA試劑盒核算得到的樣本值差異較大：
有時(shí)分咱們不清楚樣本中目的蛋白的濃度怎樣，應(yīng)該怎樣稀釋?zhuān)敲丛蹅兙蜁?huì)做下預(yù)實(shí)驗(yàn)，確認(rèn)稀釋倍數(shù)。但是有時(shí)分同一樣本做了幾個(gè)不同梯度稀釋后，核算得到的樣本值之間差異較大。
Q3.本底偏高：
樣本值測(cè)不到標(biāo)曲的本底即Blank孔的OD值一般要求控制在0.1以下(關(guān)于高敏ELISA可以恰當(dāng)放寬要求)。尤其是樣本值特別低的時(shí)分，本底過(guò)高會(huì)掩蓋目的信號(hào)，導(dǎo)致無(wú)法測(cè)到樣本值。在參加TMB顯色后，需實(shí)時(shí)觀察標(biāo)曲顯se情況。通常在S5孔有肉眼可見(jiàn)的弱小藍(lán)色，即可中止反應(yīng)。
Q4.標(biāo)曲顯色，樣本不顯色：
當(dāng)樣本中目的蛋白濃度極低或者樣本中攪擾要素較強(qiáng)，就無(wú)法檢測(cè)到。現(xiàn)在ELISA試劑盒仍然是蛋白檢測(cè)活絡(luò)度gao的方法，與不同技能結(jié)合后，衍生出了多種類(lèi)型的ELISA，提高了檢測(cè)活絡(luò)度。
Q5.不同試劑盒中的組分能否通用：
除非是共用的試劑如洗液、檢測(cè)緩沖液，其它組分不主張用其它試劑盒的組分，乃至是同一目標(biāo)不同批次的試劑盒里的組分。這些組分(包含標(biāo)準(zhǔn)品、標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液、檢測(cè)抗體、酶等)都是經(jīng)過(guò)優(yōu)化的，假如輕率運(yùn)用其它試劑盒的組分，有或許對(duì)效果產(chǎn)生影響。
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